黄灿华教授 实验室

双向电泳蛋白点的切取和保存


    1.   PDQuest 软件或肉眼比对找出感兴趣的蛋白点并做好标记和记录。

2.     MilliQ水冲洗胶 2次。

3.     用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 Ep

4.      将枪头(200µl)下端剪去使其内径略小于蛋白斑点的直径用色谱纯甲醇和

MilliQ 水冲洗枪头。

5.      对准斑点中央小心将蛋白切割下来放入 EpMilliQ水漂洗2如胶块太大将其切成 1 x 1mm的胶片。

6.    将切好的点做好标记和记录-80oC保存或冻干后-20oC存放。


注意事项

1.      尽量避免皮肤和头发的角蛋白的污染在操作过程中应戴一次性的PE手套不 用乳胶手套和帽子。

2.     不要将胶长期存放于乙酸溶液中。

3.      Ep 管及染胶的容器必须用甲醇和水充分清洗尤其应与进行Westernblotting 的容器分开以避免caseinBSA的污染。


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