黄灿华教授 实验室

胶回收纯化 DNA


胶回收DNA请注意避免回收过程的污染电极装置及整个液体系统最好与平时电泳系统分开。

1.      琼脂糖电泳将特异电泳带用刀切下放入到EP管中称琼脂糖带的重量

2.     按照每 100mg400µl的量加入bindingbuffer,放入到 EP管振荡器中4555温育振荡直到所有的琼脂糖都溶解大概要 5 分钟);

3.     取出纯化柱将上述溶解液转移至柱中室温下放置2分钟,8,000rpm离心1分钟EP管中的液体将纯化柱放回 EP管中

4.      500µlwashbuffer至柱中8,000rpm离心1分钟。弃管中的溶液

5.     重复操作 4步的操作1最后将纯化柱放入EP管中 10,000rpm离心30除去痕量的 washbuffer

6.       将纯化柱放入一个新的EP管。加30~40µl H2O或者elutionbuffer至纯化柱膜的中央3750下放置2分钟10,000rpm离心1分钟洗脱 DNA,EP 管中的 DNA 溶液放在-20保存。

7.      若想要不电泳而直接纯化DNA溶液只需要在第 2步中按100µl液量加400µl bindingbuffer,其余的步骤不变。