胶回收纯化 DNA 胶回收DNA请注意避免回收过程的污染,电极装置及整个液体系统最好与平时电泳系统分开。 1. 琼脂糖电泳,将特异电泳带用刀切下放入到EP管中,称琼脂糖带的重量; 2. 按照每 100mg加 400µl的量加入bindingbuffer,放入到 EP管振荡器中,45℃~55℃温育振荡,直到所有的琼脂糖都溶解(大概要 5 分钟); 3. 取出纯化柱,将上述溶解液转移至柱中,室温下放置2分钟,8,000rpm离心1分钟,弃 EP管中的液体,将纯化柱放回 EP管中; 4. 加 500µl的 washbuffer至柱中,8,000rpm离心1分钟。弃管中的溶液; 5. 重复操作 4步的操作1次,最后将纯化柱放入EP管中 10,000rpm离心30秒,除去痕量的 washbuffer; 6. 将纯化柱放入一个新的EP管。加30~40µl H2O或者elutionbuffer至纯化柱膜的中央,在37℃或 50℃下放置2分钟,10,000rpm离心1分钟洗脱 DNA,将EP 管中的 DNA 溶液放在-20℃保存。 7. 注:若想要不电泳而直接纯化DNA溶液只需要在第 2步中按100µl液量加400µl 的bindingbuffer,其余的步骤不变。 上一篇: 双向电泳蛋白点的切取和保存
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