琼脂糖核酸电泳

1.       用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子；实验室有几种不同厂家的模具和梳子，请注意配套使用；

2.       根据欲分离 DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称 量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般 20~30ml）；

3.       放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染料，轻轻旋转以充分混 匀凝胶溶液，倒入电泳槽中，注意不能产生气泡，若有气泡则设法排除，静置，待其凝固；

4.       室温下 30~45分钟后凝胶完全凝结，小心拔出梳子，将凝胶安放在电泳槽内；

5.       向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶面 1mm为宜，如样品孔内有气泡， 应设法除去；

6.       在 DNA样品中加入 10×体积的载样缓冲液（loadingbuffer），混匀后，用枪将 样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内；

7.       接通电源，红色为正极，黑色为负极，切记 DNA样品由负极往正极泳动 (靠 近加样孔的一端为负)。一般 60～100V电压，电泳 20～40min即可；

8.       根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳；一般前端染料到 2/3处即可；

9.       电泳完毕，关上电源，在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置，并与核酸分子量 标准 Marker比较被扩增产物的大小。