黄灿华教授 实验室

失巢凋亡检测实验

失巢凋亡(Anoikis):贴壁细胞粘附到细胞外基质(ECM)的过程对其生长和增殖具有重要的意义。一些贴壁细胞由于失去与ECM的粘附或者产生非正常的粘附而导致的细胞凋亡称为失巢凋亡(Anoikis)。失巢凋亡作为一种特殊的程序化细胞死亡形式,在机体发育、组织自身平衡、疾病发生和肿瘤转移中起重要作用。


检测手段:细胞失巢凋亡分析试剂盒。

将细胞铺在poly-Hema(一种阴离子聚合物,可以阻止细胞贴壁)包被的培养板上,通过CalceinAM/EthD-1荧光双染法(试剂盒内提供)检测发生失巢凋亡的细胞 。



注1:Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在Calcein(钙黄绿素)的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein(钙黄绿素)留在细胞内,发出强绿色荧光。

注2:溴乙啡锭二聚体(Ethidium homodimer,简写EtD-III,或者EthD-1,EtDi)是一种核酸荧光探针,但渗透不进活细胞或者凋亡的细胞,仅仅可以染色坏死的细胞核,显红色荧光(λabs/λem(with DNA) = 528/617 nm)。